- Tytuł:
-
Wpływ PBDE na aktywność enzymów biorących udział w sekrecji progesteronu przez ciałko żółte.
The impact of PBDEs on the activity of enzymes involved in the secretion of progesterone by the corpus luteum. - Autorzy:
- Grzyb, Dominika
- Opis:
-
INTRODUCTION: Polybrominated diphenyl ethers (PBDE) are synthetic aromatic compounds, that are classified as brominated flame retardants (BFR). Commercially, they are produced as a mixtures of congeners. Due the strong lipophilic PBDE its has the ability to accumulate in the tissues of living organism. Structural similarity to the natural steroids suggest that the ability of PBDEs to disturbances in hormonal homeostasis in animals and humans.OBJECT: The purpose of this study was to investigate the effect of in vitro exposure for PBDEs congeners (BDE-47, -99, -100) on the secretion of progesterone and the activity and protein expression P450scc enzyme involved in the conversion of cholesterol to progesterone and 3β-HSD enzyme involved in the conversion of pregnenolone to progesterone in luteal cells. MATERIALS AND METHODS: As a model we used the primary culture cells of the corpus luteum derived from middle luteal phase. Cells were cultured in Parker medium (M199) supplemented with 10% FBS. Cells were exposed for BDE-47 (250 ng/ml), BDE-99 (250 ng/ml) and BDE-100 (250 ng/ml), substrates for progesterone synthesis: P5 (5 µg/ml) and 25-OH (20 µg/ml) and inhibitor of P450scc enzyme: AMG (10 µg/ml). The activity of P450scc and 3β-HSD enzymes were determined by conversion of 25-0H to progesterone and P5 to progesterone respectively. The expression of P450scc protein and 3β-HSD were determined by Western Blot.RESULTS: All the congeners have no effect on P450scc activity and protein expression. Stimulatory action on 3β-HSD activity was noted only under the influence of BDE-99 and the increase protein expression for this enzyme under the influence of all investigated congeners with the highest expression after exposure to BDE-99.CONCLUSION: The studies show that short-term exposure to PBDEs congeners stimulates the secretion of progesterone. This action is related to the stimulus effect on the expression of protein for 3β-HSD.
WSTĘP: Polibromowane etery difenylowe (PBDE) są to syntetyczne związki aromatyczne zaliczane do substancji zmniejszających palność (BFR). Komercyjnie występują w postaci mieszanin kongenerów. Ze względu na silną lipofilność PBDE wykazują zdolność do akumulacji w tkankach organizmów żywych. Podobieństwo strukturalne do naturalnych steroidów sugeruje zdolność PBDE do zaburzeń homeostazy hormonalnej u zwierząt i ludzi.CEL PRACY: Celem niniejszej pracy było zbadanie wpływu in vitro kongenerów PBDE (BDE-47, -99, -100) na sekrecje progesteronu oraz aktywność i ekspresję białka enzymu P450scc biorącego udział w konwersji cholesterolu do pregnenolonu i enzymu 3β-HSD biorącego udział w konwersji pregnenolonu do progesteronu w komórkach ciałka żółtego.MATERIAŁY I METODY: Modelem badawczym była hodowla pierwotna komórek ciałka żółtego izolowanych w środkowym okresie fazy lutealnej. Hodowlę prowadzono w medium Parkera (M199) z dodatkiem 10% FBS. Komórki były eksponowane na działanie BDE-47 (250 ng/ml), BDE-99 (250 ng/ml) i BDE-100 (250 ng/ml), substratów: P5 (5 µg/ml) i 25-OH (20 µg/ml) i inhibitora enzymu P450scc: AMG (10 µg/ml). Aktywność enzymów P450scc i 3β-HSD określono na podstawie odpowiednio konwersji 25-OH i P5 do progesteronu. Ekspresję białek P450scc i 3β-HSD zbadano stosując Western Blot. WYNIKI: Wykazano brak wpływu kongenerów BDE-47, -99, i -100 na aktywność i ekspresję białka P450scc. Wykazano stymulacyjny wpływ BDE-99 na aktywność 3β-HSD oraz wzrost ekspresji białka dla tego enzymu pod wpływem wszystkich badanych kongenerów z najwyższą ekspresją po ekspozycji na BDE-99.WNIOSKI: Przeprowadzone badania dowodzą, że krótkotrwałe narażenie na PBDE stymuluje sekrecje progesteronu. Działanie to jest związane ze stymulacyjnym wpływem na ekspresję białka dla 3β-HSD. - Dostawca treści:
- Repozytorium Uniwersytetu Jagiellońskiego
Inne