Temat: retrovirus - Prolib Integro

Skocz do pozycji: 1.

Tytuł:: Retroviral targeting of proliferating endothelial cells
Autorzy:: Gornikiewicz, Alexander
Zommer, Anna
Jakesz, Raimund
Gnant, Michael
Brostjan, Christine
Tematy:: targeting
endothelial cell
envelope glycoprotein
angiogenin
retrovirus; Pokaż więcej
Wydawca:: Polskie Towarzystwo Biochemiczne
Powiązania:: https://bibliotekanauki.pl/articles/1041388.pdf Link otwiera się w nowym oknie
Opis:: Tumor growth requires the formation of new blood vessels by endothelial cells. Thus, surface molecules - such as angiogenin receptors - that are selectively expressed on growing endothelium represent an attractive target for directed delivery of compounds to tumor tissue. We attempted to obtain genetically engineered retroviral vectors targeted to the endothelium by inserting the human angiogenin sequence into Moloney murine leukemia virus envelope glycoprotein. Abundant expression of the chimeric protein could be verified. However, while being selective for proliferating human endothelial cells, the recombinant retroviral particles displayed low transduction efficiencies and thus have to be further improved.
Dostawca treści:: Biblioteka Nauki

Artykuł

na półce

Skocz do pozycji: 2.

Tytuł:: Low recombination activity of R region located at both ends of the HIV-1 genome
Autorzy:: Urbanowicz, Anna
Kurzyńska-Kokorniak, Anna
Jankowska, Anna
Alejska, Magdalena
Figlerowicz, Marek
Tematy:: copy-choice mechanism
template switching
homologous RNA recombination
strand transfer
R region
RNA virus
retrovirus; Pokaż więcej
Wydawca:: Polskie Towarzystwo Biochemiczne
Powiązania:: https://bibliotekanauki.pl/articles/1039669.pdf Link otwiera się w nowym oknie
Opis:: Although two strand transfer events are indispensable for the synthesis of double-stranded DNA and establishing HIV-1 infection, the molecular basis of these phenomena is still unclear. The first obligatory template switching event occurs just at the beginning of the virus replication cycle and involves two copies of the 97-nucleotide long R region, located one each at the both ends of the HIV-1 genome (HIV-1 R). Thus, one can expect that the molecular mechanism of this process is similar to the mechanism of homologous recombination which operates in RNA viruses. To verify the above-mentioned hypothesis, we attempted to assess the recombination activity of HIV-1 R. To this end, we tested in vitro, how effectively it induces template switching by HIV-1 RT in comparison with another well-characterized sequence supporting frequent homologous crossovers in an unrelated virus (R region derived from Brome mosaic virus - BMV R). We also examined if the RNA sequences neighboring HIV-1 R influence its recombination activity. Finally, we tested if HIV-1 R could cause BMV polymerase complex to switch between RNA templates in vivo. Overall, our results have revealed a relatively low recombination activity of HIV-1 R as compared to BMV R. This observation suggests that different factors modulate the efficiency of the first obligatory strand transfer in HIV-1 and the homology-driven recombination in RNA viruses.
Dostawca treści:: Biblioteka Nauki

Artykuł

na półce

Skocz do pozycji: 3.

Tytuł:: Development of soluble RBD ligands as new diagnostic and therapeutic tools in cancer research
Wykorzystanie rozpuszczalnych ligandów RBD jako nowatorskich narzędzi w diagnostyce i terapii antynowotworowej
Autorzy:: Ogończyk-Mąkowska, Daniela
Opis:: Wobec szybkiego tempa wzrostu komórki rakowe potrzebują stałego dostępu do substancji odżywczych by zasilać różne ścieżki biosyntetyczne. Charakterystyczne dla komórek rakowych zmiany w metabolizmie, odróżniające je od komórek prawidłowych, często idą w parze ze zmianami w ekspresji błonowych transporterów substancji pokarmowych, czyniąc je potencjalnym celem dla selektywnych terapii anty-nowotworowych. Intensywne wykorzystanie składników odżywczych takich jak glukoza, glutamina, arginina, prolina i seryna, zostało zaobserwowane dla różnych rodzajów nowotworów, sugerując, że nadekspresja odpowiednich transporterów, często należących do rodziny SLC (Solute Carriers), na powierzchni komórek może towarzyszyć temu zjawisku. Białka SLC zostały także zidentyfikowane jako receptory umożliwiające niektórym γ-retrowirusom wejście do wnętrza komórki. Każdy z poszczególnych rodzajów γ-retrowirusów charakteryzuje się unikalną zdolnością do selektywnej interakcji ze swoim przynależnym receptorem. Specyficzność oddziaływania jest uwarunkowana obecnością domeny RBD (Receptor Binding Domain) na N-końcu powierzchniowego fragmentu glikoproteiny, stanowiącej element otoczki wirusowej. Domeny RBD mogą być produkowane w formie niezwiązanej z błoną cząsteczki, w której nie tylko zachowują swoją zdolność do wykrywania i wiązania docelowego receptora, ale także do upośledzania jego funkcji transportowej. Około 25% z transporterów przynależących do SLC jest zaangażowane w rozwój różnych chorób u człowieka, w związku z czym określenie poziomu ekspresji SLC w kontekście nowotworzenia jest silnie uzasadnione. Na chwilę obecną specyficzne przeciwciała rozpoznające zewnątrzkomórkowe epitopy SLC nie są dostępne, co znacznie utrudnia badania nad tą grupą białek transportowych. W niniejszej pracy, rozpuszczalne RBD o retrowirusowym pochodzeniu zostały zbadane w kontekście ich wykorzystania jako nowatorskich narzędzi w strategiach terapeutycznych przeciwko rakowi jelita grubego. W pierwszym etapie wiązanie dwóch odrębnych RBD do powierzchniowego transportera, należącego do rodziny SLC, zostało oznaczone w linii komórkowej raka jelita grubego. W celu zweryfikowania, czy obniżenie ekspresji tego transportera zmniejsza intensywność wiązania badanych RBD, za pośrednictwem wektorów lentiwirusowych przenoszących shRNA (short hairpin RNA), skierowane przeciwko interesującemu nas białku, wyprowadzono linie komórkowe z jego obniżoną ekspresją. Następnie za pomocą cytometrii przepływowej zbadano siłę sygnału odpowiadającego wiązaniu rozpuszczalnych RBD. W kolejnym kroku oznaczono poziom ekspresji tego transportera w próbkach tkanki raka jelita grubego i odpowiedniej kontroli w postaci tkanki zdrowej, wykorzystując RBD do immunohistochemicznego wybarwiania próbek pobranych od pacjentów. Kolejnym etapem było zbadanie, czy zahamowanie proliferacji komórek raka jelita pod wpływem działania RBD wiążącego interesujące nas SLC, obserwowane w badaniach in vitro, będzie również występować w doświadczeniach in vivo. W tym celu zbadano wpływ podania tego RBD na objętość guzów nowotworowych powstałych u myszy z upośledzonym układem immunologicznym po wszczepieniu komórek raka jelita grubego metodą ksenoprzeszczepu. W niniejszej pracy zaprezentowano rozpuszczalne RBD jako innowacyjne narzędzie zdolne do selektywnej detekcji i wiązania powierzchniowych SLC in vitro, które może zostać potencjalnie użyte do immunohistochemicznej charakteryzacji próbek tkanki pobranych od dawców i pozwolić na lepsze poznanie roli specyficznych SLC w rozwoju chorób nowotworowych. Na podstawie wyników eksperymentów in vivo zademonstrowano, że RBD są dobrze tolerowane u myszy z upośledzonym układem immunologicznym i że ich potencjał do hamowania rozwoju komórek nowotworowych, obserwowany in vitro, nie znajduje odpowiednika in vivo przy przyjętych warunkach eksperymentalnych.
To sustain their intense growth and proliferation, cancer cells must be provided with high quantities of specific nutrients and maintain high rates of various biosynthetic pathways, thus strictly relying on nutrient transport across their cellular membrane. Changes in the expression of specific surface nutrient-transporters that accompany pronounced differences in metabolic requirements distinguish cancerous from healthy tissues, make these alterations relevant to anti-cancer therapies. Thus, selective excessive consumption of either glucose, glutamine, arginine, proline or serine has been observed in specific types of cancers, suggesting that overexpression of the corresponding transporter, usually a member of the solute carrier family (SLC), at the surface of cancer cells, is likely to accompany this dependence. Members of the SLC family, the largest family of nutrient transporters, have also been identified as entry receptors for γretroviruses. Each member of the γ-retrovirus genus has a unique ability to selectively recognise and bind its cognate receptor. The specificity of this interaction is ensured by aminoterminal RBD (Receptor-Binding Domain) of retrovirus-encoded envelope glycoprotein. RBDs can be produced as soluble particles and they have been proved not only to retain their detection and binding capacity, but also to impair the function of their target transporters. There is a recurrent need for reliable biomarkers that enable unequivocal and precise distinction between cancerous and healthy cells, as well as for the characterization of different stages of cancer progression. Since over 25% of SLC are associated with various human diseases, assessment of SLC expression in the context of cancer is warranted. At present, no reliable antibodies directed against SLC extracellular epitopes are available, hindering SLC-centred research. This works presents RBDs as the first tools capable of selective binding of surface SLC, which can circumvent this paucity of reliable surface nutrient-transporter ligands. In the present study, we evaluated retrovirus-derived RBDs for their further use as novel therapeutic tools in anti-tumoral treatment, in the context of colorectal cancer. We first assessed binding specificity of two distinct RBDs towards specific SLC nutrient transporters on a colorectal cancer cell line. For this purpose, we used lentiviral vectors to transduce shRNAs (short hairpin RNAs) directed against the SLCs of interest into a colorectal cancer cell line, and measured by flow cytometry whether shRNAs indeed decreased binding of the cognate RBDs. Secondly, RBDs that target SLCs of interest were used as ligands to follow expression pattern of these transporters in colorectal cancer samples and in a healthy tissue by immunohistochemistry. Due to the observation that RBDs targeting a specific SLC inhibited both uptake of the corresponding nutrient and proliferation of colorectal Cell Line A, we next assessed for the first time the in vivo antitumoral effects of RBDs injected in immunodeficient mice xenografted with the human colorectal cancer Cell Line. In summary, the presented study indicates that RBD ligands can be used as selective tools, able to recognise their cognate SLCs in vitro and that they can be potentially used in immunohistochemical characterisation of donor-derived tissue samples. This work also shows that RBDs are well-tolerated in vivo, although their anti-tumoral effect, observed in vitro, is not concordant with the results in vivo in present experimental conditions.
Dostawca treści:: Repozytorium Uniwersytetu Jagiellońskiego

Inne

na półce

Informacja

Wyszukujesz frazę "retrovirus" wg kryterium: Temat